설명: 코로나바이러스(COVID-19)를 감지하는 5단계

NIMHANS 신경바이러스학과 수석 교수이자 책임자인 Dr V Ravi는 이 과정을 Indian Express에 설명했습니다.

2020년 3월 17일에 찍은 이 그림에서 코로나바이러스(COVID-19)로 표시된 시험관에서 가짜 혈액이 보입니다. (로이터)

NIMHANS의 신경 바이러스학과 수석 교수이자 책임자인 Dr V Ravi는 코로나바이러스를 감지하는 과정을 설명합니다. 이 웹사이트 . 다음은 5단계입니다.

수집 및 운송

검사 센터는 비강과 인두 뒤쪽(인두)에서 면봉을 채취하여 바이러스가 분해되는 것을 방지하기 위해 균형 잡힌 염과 알부민이 들어 있는 바이러스 수송 배지에 검체를 넣습니다. 그런 다음 샘플은 냉장 보관소에서 테스트 실험실로 운송됩니다.

바이러스 RNA의 추출

SARS-CoV(2002-03년 중국에서 출현), MERS-CoV(2012년 사우디아라비아에서 출현) 또는 COVID-19 대유행을 일으킨 현재 SARS-CoV-2와 같은 코로나바이러스는 큰 , 단일 가닥 RNA 게놈. 테스트 랩은 상업적으로 이용 가능한 키트(QIAGEN과 같은 회사에서 만든 것과 같은)를 사용하여 샘플에서 RNA를 추출합니다.

THE RNA를 PCR 믹스에 넣기

추출된 RNA는 중합효소연쇄반응(PCR) 믹스에 추가됩니다. 여기에는 RNA를 DNA로 변환하는 '역전사효소' 효소가 포함된 '마스터 믹스'가 포함됩니다. 마스터 믹스에는 DNA의 복사본을 생성하는 효소인 Taq 중합효소, 뉴클레오타이드, 마그네슘과 같은 기타 요소(DNA 증폭에 필요한 이온)가 포함되어 있습니다.

PCR 믹스에는 '프라이머' 및 '프로브'와 같은 '시약'도 포함되어 있습니다. 프라이머는 복사할 DNA와 결합하도록 설계된 특정 DNA 가닥입니다. 프로브는 DNA 샘플의 특정 서열을 감지하는 데 사용됩니다. WHO는 COVID-19 테스트를 위해 특정 프라이머와 프로브를 권장했습니다.

마지막으로, PCR 믹스는 하우스키핑 유전자로 구성되어 있습니다. 샘플을 적절하게 수집하고 RNA를 추출하는 데 사용되는 정상 인간 유전자(RNase P)입니다.

바이러스 DNA의 증폭

PCR 믹스의 샘플을 튜브나 플레이트에 넣은 다음 PCR 프로세스를 수행하는 데 사용되는 열 순환 장치에 넣습니다.

첫째, RNA는 DNA로 변환됩니다. 그런 다음 유전자를 복사하는 과정이 시작됩니다. Thermal Cycler는 샘플과 함께 혼합물을 가열 및 냉각하며, DNA를 녹여 두 가닥을 분리하고 프라이머가 DNA에 결합하고 새로운 가닥을 합성하는 세 가지 온도를 번갈아 가며 한 주기 동안 지속됩니다. 분. 열 순환기는 바이러스를 확인하기 위해 DNA를 증폭하기 위해 이러한 주기를 30-40번 실행합니다.

컨트롤에 대한 테스트

증폭된 DNA는 일반적으로 플라스미드에 복제된 바이러스의 유전자로 구성된 양성 대조군과 이전에 바이러스에 대해 음성 판정을 받은 '알려진' 샘플인 음성 대조군에 대해 테스트됩니다.

RNase P는 증폭을 보여야 하고, 양성 대조군은 양성이어야 하고, 음성 대조군은 음성이어야 하며, 그런 다음 표본에 대해 얻은 결과가 무엇이든 올바른 결과라고 신경바이러스학자 V Ravi 박사는 말했습니다. 결과가 발표되기 전에 테스트가 유효하려면 특정 '유효성 기준'이 충족되어야 합니다.

설명을 놓치지 마세요 | COVID-19 테스트 작동 방식

하우스키핑 유전자(RNase P)가 양성이고, 양성 대조군이 양성이고, 음성 대조군이 음성이고, 샘플에서 PCR 양성 결과를 나타내지 않으면 샘플은 SARS-CoV-2 바이러스 RNA에 대해 음성으로 선언됩니다. PCR 결과가 양성이면 환자는 COVID-19입니다.

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